检测氯霉素的行业标准

我们公司现在用的氯霉素检测方法，发出来大家给点意见哈～
1. 试剂和材料
- 氯霉素试剂盒（德国r-Biopharm的）
- 乙酸乙酯（分析纯）
- 双蒸水
2. 仪器设备
- 酶标仪（MuLtisKan Ascent，芬兰Labsystens）
- 8道移液器（50-300μL）
- 单道移液器（5-50μL、20-200μL、100-1000μL、1-5mL）
- 离心机
- 旋转蒸发仪（带真空冷却）
- 混匀仪
3. 样品前处理
3.1 提取
称约2g蜂蜜（精确到0.01g）放20mL带盖试管里，加4mL双蒸水溶解，再加4mL乙酸乙酯，混匀仪上摇10分钟。
转移到10mL离心管，4000转离心12分钟。
3.2 净化
取1mL上层乙酸乙酯（相当于0.5g样品）到新试管，60℃以下旋转蒸干。
残留物加0.5mL缓冲液1溶解，混匀，这就是样品溶液，待测。
4. 测定
4.1 酶标仪参数：450nm
4.2 操作（室温20-24℃进行）
4.2.1 准备工作
把试剂盒所有试剂恢复到室温。
氯霉素酶标记物和抗体用缓冲液1按1:11稀释，吸之前一定要摇匀！
4.2.2 标准液配制（全用玻璃瓶，别用塑料！）
每个标准浓缩液取50μL，加450μL缓冲液1稀释，混匀：
- 标准1：50ppt（原液1）
- 标准2：50ppt（原液2）
- 标准3：150ppt
- 标准4：450ppt
- 标准5：1350ppt
- 标准6：4050ppt
4.2.3 检测步骤
按需取酶标板条，每孔先加50μL标准液或样品。
再依次加50μL稀释好的酶标记物、50μL稀释好的抗体，轻轻震荡混匀（桌上画圈摇）。
盖上封板膜，室温孵育2小时（加抗体时枪头别碰液面，防污染！）。
孵完倒掉液体，板子倒扣在吸水纸上拍4下，确保液体甩干净。
每孔加250μL蒸馏水，同样画圈混匀，倒掉，重复洗两次。
洗的时候枪头离孔约1cm，别插进去。洗完马上进下一步，别让孔干了！
然后每孔加50μL底物 + 50μL显色剂，轻轻混匀，室温避光孵育30分钟。
同时准备好终止液。
孵完立刻加100μL终止液，混匀，马上测OD值。
如果不能马上测，放暗处，60分钟内必须测完（450nm）。
5. 试剂空白
用2mL双蒸水代替样品，其他步骤一样走一遍。
6. 结果计算
标准曲线法：
把每个标准和样品的OD值平均后，除以0标准的OD值，再×100%，得到百分比吸光度。
然后用这个百分比去拟标准曲线，算出样品浓度。
有啥建议欢迎留言～

各银行各行业POS机收费标准
Pos机收费标准：按交易量的百分比扣除，按行业不同扣率不同，一般行业为1%，特殊行业为2%左右（如宾馆、酒店、珠宝、工艺品等）。大宗交易和批发交易，扣率封顶，一般为0.5%-1%，单笔20元或50元封顶。
各银行都是一样的
pos机手续费怎么算
pos机手续费公式是消费金额乘以pos机手续费费率。
商店接受客户刷卡后，需支付百分之二至三的手续费给银行和信用卡中心。称为刷卡手续费。特约商店接受客户刷卡后，需支付百分之二至三的手续费给银行和信用卡中心。有些厂商为节省成本，会要求持卡人另外支付手续费，因为刷卡就必需开立发票，使商店无法逃税。
根据现行的《中国银联入网机构银行卡跨行交易收益分配办法》，银行卡收单业务的结算手续费全部由商户承担，但不同行业所实行的费率不同，费率标准从0.5%到4%不等。一般来说，零售业的刷卡手续费率在0.8%-1%，超市是0.5%，餐饮业为2%。
扩展资料
2012年11月，央行下发《中国人民银行关于切实做好银行卡刷卡手续费标准调整实施工作的通知》称，此次手续费下调仅涉及境内银行卡的消费交易，2003年施行的商户刷卡手续费规定自2013年2月25日起同时废止。此次刷卡费率总体下调幅度在23%至24%。
央行通知附件显示的银行卡刷卡手续费标准，维持了现行刷卡手续费行业差别化定价，行业分类主要分成餐饮娱乐类、一般类、民生类以及公益类四大类，总体下调幅度在23%至24%，其中餐饮娱乐类下调幅度为37.5%。
第一类为餐娱类，包括餐饮、娱乐、珠宝、工艺美术品、房地产及汽车销售，整体费率由原来的2%下调到1.25%，降幅达37.5%。
其中发卡行服务费0.9%，银行卡清算机构网络服务费0.13%，收单服务费基准价（可上下浮动10%）0.22%，房产汽车销售单笔费率由原来的每笔10元，全部上调到80元封顶。
第二类为一般类，包括百货、批发、社会培训、中介服务、旅行社、景区门票等，整体费率下调到0.78%，其中发卡行服务费0.55%，银行卡清算机构网络服务费0.08%，收单服务费基准价（可上下浮动10%）0.15%，同时批发类封顶26元。
第三类为民生类，主要包括超市、大卖场、水电煤气缴费、加油、交通运输售票等，整体费率为0.38%。第四类则是零费率的医院、教育等公益类。
参考资料来源：百度百科—刷卡手续费
珠宝pos机费率？
这得看你营业执照上的经营范围，如果确定是：贵重珠宝首饰，那就是2%。

你好！

你是说普通发票多开么？

这个一般就是多开也就50-100，构成犯罪么？

希望对你有所帮助，望采纳。

按JB/T4730要求，探伤设备采用的是校准。由体系文件作业指导书规定作业过程。RT的黑度计、辐射剂量仪等必须计量检定。

氯霉素检验方法 －－这是我们公司现在使用的方法，发上来大家指导指导
1. 试剂与材料
1.1氯霉素试剂盒，德国r-Biopharm公司
1.2乙酸乙酯，分析纯
1.3双蒸水
2.仪器与设备
2.1微孔板酶标仪，MuLtisKan Ascent,芬兰Labsystens公司。
2.2 8道移液器，50-300uL
2.3 单道移液器，5-50ul,20-200ml,100-1000ul,1-5ml
2.4 离心机。
2.5 旋转蒸发器，配真空冷却系统。
2.6 液体混匀器。
3.样品前处理
3.1样品提取 称取约2g（准确至0.01g）蜂蜜于20ml具塞试管中，加入用4ml双蒸水溶解，再加4ml乙酸乙酯，在混匀器上混匀10分钟。将上述样液转至10ml离心管中，以4000转/分离心12分钟
3.2净化 从上述离心管中移取1ml上层的乙酸乙酯（相当于0.5样品）至另一试管中，60℃以下减压旋转蒸干，残留物用0.5ml缓冲液1溶液，此为样品溶液，供酶标仪测定
4.测定
4.1 酶标仪测定条件
酶标仪测定波长为450nm
4.2 酶标测定（以下操作在20-24℃室温条件下进行）
4.2.1测定之前的准备工作
将氯霉素酶试剂盒附带的所有试剂回升至室温20-24℃。其中氯霉素酶标记物、氯霉素抗体用缓冲液1以1；11的比例稀释，在吸取浓缩液之前，要仔细振摇使之充分混匀
4.2.2 标准应用的制备；50uL标准浓缩液（氯霉素试剂盒附带）用450uL缓冲液1稀释并混合均匀用玻璃不能用塑料瓶
标准应用液1：50uL标准浓缩液1用450uL缓冲液1稀释oppt
标准应用液2：50uL标准浓缩液2用450uL缓冲液1稀释50ppt
标准应用液3：50uL标准浓缩液3用450uL缓冲液1稀释150ppt
标准应用液4：50uL标准浓缩液4用450uL缓冲液1稀释450 ppt
标准应用液5：50uL标准浓缩液5用450uL缓冲液1稀释1350ppt
标准应用液6：50uL标准浓缩液6用450uL缓冲液1稀释4050ppt
4.2.3.测定程序：
取出实验需要数量的微孔板条，按顺序加入50ul标准或处理好的样品到各自的微孔中，加入50ul稀%@FI
释了的酶标记物到微孔底部，加入50ul稀释了的抗体溶液到每一个微孔中充分混合（轻轻振荡板并在桌面上做圆周运动以混均）用薄膜覆盖板上在室温孵育2小时（注意在加入抗体的过程中移液器管尖千万不要接触到放进孔中的液体，避免交叉污染）
倒出孔中的液体，将微孔架倒置在吸水纸上拍打（拍打4次）以保证完全除去孔中的液体，用250ul蒸馏水充入孔中（轻轻振荡板并在桌面上做圆周运动），再次倒掉微孔中液体，重复操作两遍。注意在洗板过程中加洗涤水的移液器管尖必须置于微孔板上方约1厘米处打出洗涤水。洗板后立即进行下一步
操作不要让板孔干燥。
迅速加入50ul基质及50ul发色剂到每一个孔中，轻轻振荡板并在桌面做圆
周运动以混均。室温孵育微孔板30分钟，注意暗处避光放置。在恒温孵育期间准备好反应停止液
加入100ul反应停止液，混匀。立即测量，如果不能立即测量请放置在暗处并于60分钟内450nm测量OD值
5.试剂空白
以2 ml双蒸水代替样品，按上述步骤提取
6结果与计算
6.1绘制标准曲线法
所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以第一个标准（0标准）的吸光度值再乘以100，因此0标准等于100%，吸光度值的百分比表示。
标准（或样品）的吸光度值360
×100 ＝ %吸光度
0标准的吸光度值

计算标准的值并绘成一个以氯霉素浓度（ng/kg）为半对数坐标系统的曲线图，曲线在50-1350ng/kg(ppt)范围内应当成为线性。相对应每一个样品的浓度（ng/kg）可以从校正曲线上读出。为了获得样品中氯霉素的实际浓度（ng/kg）,从校正曲线上读出的浓度值必须乘以相对应的稀释系数。（可采用Labsystens公司提供的MuLtisKan Ascent软件，从计算机上编制测定程序并进行数据处理，可直接读取样品氯霉素的浓度值）。7.方法的检出限、回收率
7.1本方法氯霉素的检出限为125ng/kg(ppt)
7.2 回收率: 90%
对蜂蜜样品进行的回收率实验,结果如下表示.
样品本底值(ng/kg)添加值(ng/kg)测定值回收率
蜂蜜